¿Cómo preparar un envío a una instalación criónica?

En caso tener ya su centro criónico seleccionado y los pagos realizados, es necesario en tener una serie de documentos preparados para el envío del cuerpo de la mascota. 

Documentos:

1. Historial de la mascota.
2. Acta de defúnción de la mascota y motivo.
3. Documento que confirma que no tiene nigún agente patógeno.
4. La documentacion por triplicado y pegado en la superficie de la caja.
5. La dirección exacta a donde enviarlo.

Envío:

1. Una caja de cartón resistente.
2. Cinta americana plateada. (Reflexión y por tanto reducción de calor)
3. Caja de porexpan del tamaño suficiente para tener a la mascota más 25 kilogramos de hielo seco.
4. 25 kilogramos de hielo seco. (sale a 100 € en España)
5. Bolsa zip plateada para el cuerpo.
6. Que la empresa mensajera lo envíe en una cámara refrigerada. (ideal 5º C-7ºC máximo)
7. Buscar,analizar y seleccionar cuidadosamente a la empresa mensajera. Dejar muy claras las instrucciones tanto en la veterinaria de origen donde se almacena el cuerpo cómo en la empresa mensajería.

 Consejo: La empresa debe ser transparente en todo momento con el cliente. Que permitan hacer seguimiento. Que permitan tener informado al mensajero o transportista de lo que está llevando. Que permita comunicación con el centro receptor para ayudar en el proceso. Tenga mucho cuidado con éste paso.

Conclusión: Hasta el momento la empresa más fiable y conocida en el sector Español es Polarexpres para envíos urgentes internacionales de muestras biológicas. Tienen experiencia previa con un cerebro humano.

El coste para un animal por transporte Courier (vehiculo de tierra) sale por unos 1000 €, el aereo es por 1350€.
Courier: en camión no refirgerado, en una caja plástica aislante especial que garantiza hasta 130 horas el mantener el hielo seco que roeada el cuerpo. Es lento pero barato.
Aereo: No más de 24 horas de espera. En cabina refrigerada.

Disponen del enlace aquí Polarexpres.

¿Cómo construir una caja de stand-by para mascotas?

En criónica existe un dispositivo para recién fallecidos, llamado cama de Stand-By- Podemos traducirlos por cama o caja de hibernación. Consiste en una camilla hecha de tela resistente impermeable, que se llena con agua fría y hielos para enfriar el cuerpo mientras se le hace RCP y se le inyectan los fármacos.

En éste caso para mascotas pequeñas podemos usar una caja de porexpan de las que se usan para llevar el pescado en largas distancias. Se llenaría una capa de hielo, se deposita a la mascota y se la cubre con hielo en parte. Se deposita un poco de agua, sal, bicarbonato y vinagre.

¿Por qué todos éstos elementos? Por que el agua circulando enfría el cuerpo, el hielo enfría el agua, que se derrite con la sal, que transmite calor al agua y se transmite por evaporación al aire. Ésta última acelerada por la combinación de vinagre y bicarbonato.

Al bajar la temperatura, junto con los fármacos y el RCP; mantiene el metabolismo al mínimo, reduciendo la hipoxia y la isquemia (o daño circulatorio)

Busque el manual para RCP para su mascota en Internet.

Se aplica si el animal fallece en casa. Y así llevarlo en coche lo más rápido posible. Eso permite que haya una oportunidad de preservarlo.

Las fotos muestran aspecto de la caja y contenido con una lista de los elementos de la caja. Todos se pueden comprar en tiendas de barrio, Aliexpres, Alibaba, eBay, Amazón o Segunda mano.

Lista de elementos:

1. Una caja de porexpan para hielo.
2. Un sobre con procedimiento RCP. (Reanimación Cardio Pulmonar:clic aquí)
3. Un sobre con las instrucciones para la veterinaria, hielo y hielo seco.
4. Una bata de laboratorio.
5. Botes de vidrio opaco hermético para muestras.
6. Un kilo de sal.
7. Una bolsa térmica.
8. Seis condensadores de frío.
9. Dos paquetes de gel frío.
10. UN conjunto de Etiquetas.
11. Un bolígrafo.
12. Un termómetro termopar.
13. Una caja de guantes de látex o nitrilo.
14. Un paquete de mascarillas.
15. Un paquete de gorros de celulosa.
16. Un medidor brix (indica el grado de perfusión)
17. Un kit médico de mascotas.
18. Un paquete de bolsas zip extra grandes.

¿Cómo montar un equipo de perfusión por gravedad?

A veces no se tiene un perfusionista (embalsamador) a mano o el veterinario no tiene experiencia en éste tipo especial de casos. Para tal situación Alcor recomendó la Perfusión por Gravedad. Es un dispositivo que consta de una percha con gancho para colgar una botella de perfusión a determinada altura, que está abierta por arriba (diríamos, el culo de la botella)

Se deriva una vía central de la botella que se divide en dos para entrar o por las carótidas o por las aortas con dos cánulas. La presión atmosférica y la gravedad harían el trabajo. Se puede aprovechar que en la clínica tengan una percha regulable en altura para colgar la botella de perfusión por gravedad. Se puede improvisar una mediante una botella de perfusión de un litro, cortando una sección de la base ( el culo de la botella) y con una vía dividida en Y , en dos.

El veterinario tendrá que hacer la cirugía para acceder las carótidas o a las aortas.

¿Cómo preservar tejido biológico por si todo falla?

A veces no se puede llegar a tiempo para congelar o crío-preservar el ser vivo. La forma de bajo coste de preservación de tejido biológico o ADN es por medio de tomar del cadáver en la veterinaria una muestra de tejido (un trozo de oreja) y guardarlo en un frasco de 30 mililitros de capacidad y cristal oscuro (protección de luz y UV) en una solución formulada tanto para preservar cómo para proteger del frío en un congelador común.

Una posible tienda , donde lo podes obtener. La formula es una versión modificada FAA para preservar muestras.

Formula FAAGS:

1. Una parte de formol.
2. Una parte de alcohol.
3. Una parte de ácido acético.
4. Una parte de glicerina (anticongelante).
5. Cloruro sódico.

Se deposita la muestra dentro se cierra herméticamente, se etiqueta con el nombre de la mascota y se guarda en el congelador. Es posible que en el futuro la clonación de la mascota sea asequible. 

¿Cómo fabricar VM-1?

En éste paso vamos a fabricar VM-1 (Vitrificant Mixture o Mezcla Vitrificable), que es la fase cuatro del proceso. Aplica la formula de anticongelantes para proteger crío-biológicamente el cerebro animal. Y protegerlo del proceso de congelación.

Se puede preparar para 1/2 L (animal pequeño) o 1L (animal grande)

o 20L (Ser humano).

Nota 1: EG significa Etilen glicol, que equivale a monoetilen glicol.
Nota 2: El DMSO es sólido a 18ºC, para fundirlo con cuidado envuélvalo en una manta térmica al nivel mínimo por no más de 10 minutos.

Nota 3: El DMSO es exo-térmico al mezclarse con agua, tenga cuidado. Libera calor. Ideal, mezclar en botella de cristal o cazo de acero inoxidable.

Nota 4: Los experimentos realizados por CI indican que éstas cantidades aseguran la protección crio-génica por vitrificación.

Para medio litro de VM-1.

1. Tomar una botella preparada de medio litro.
2. Retirar 350 mililitros, el 70%.
3. En un bol verter 175 mililitros de EG.
4. En el mismo bol verter 175 mililitros de DMSO.
5. Verter lentamente la mixtura por un embudo a la botella.
6. Con cuidado cerrar y sacudir. Reacción exo-termica. (Precaución)
7. Dejar reposar.
8. Pasar por filtro de dos micras para asegurar esterilidad.
   
9. Almacenar en congelador.

Para un litro de VM-1.

1. Tomar una botella preparada de un litro.
2. Retirar 700 mililitros, el 70%.
3. En un bol verter 350 mililitros de EG.
4. En el mismo bol verter 350 mililitros de DMSO.
5. Verter lentamente la mixtura por un embudo a la botella.
6. Con cuidado cerrar y sacudir. Reacción exo-termica. (Precaución)
7. Dejar reposar.
8. Almacenar en congelador.
   

Para veinte litros de VM-1.

1. Mismo procedimiento que para un litro, simplemente multiplique por veinte las cantidades.
   

Caso especial para agregar selvol. (Bajo investigación)

En caso de que se decida agregar a la formula selvol (polivinil alcohol o alcohol de polivinilo ) para prevenir cualquier posible cristalización por hielo o prevenir la des-vitrificación, es necesario antes asegurar que el agregado de ésta formula no incrementa la complejidad de la operación por aumento de viscosidad por frío. Es necesario hacer experimentos para asegurarnos de su validez en todos los aspectos.

Preparación :

1. Separar 100 ml de suero
2. Disponer en un recipiente estéril
3. Mientras se remueve (30'), disolver lentamente 1 gramo.
4. Formará gel, dejar reposar por 24 horas.
5. Remover puntualmente cada dos horas. Usar una alarma programada.
6. Disponer un recipiente estéril con embudo, filtro de dos micras.
7. Filtrar y mezclar con el resto del suero, usando una jeringa. (100 ml + 900ml =1L)

Fuente:

• Link
• CI
  

¿Cómo fabricar solución de los pasos dos y tres?

Con las cuatro botellas de 1/2L (animal pequeño) o 1L (animal grande) o 5L (ser humano) de perfusato (estas cantidades son para cada fase) preparadas ya tenemos la base para las fases 1,2,3y 4.

La fase 1 (limpieza circulatoria) estaría preparada. Ahora tocan la fase dos y tres. Que sirven para a la hora de perfundir, incluir etilen glicol en el sistema circulatorio para prevenir daño osmótico y proteger de cualquier toxicidad por los anticongelantes.

Nota: EG significa Etilen Glicol, que equivale a monoetilen glicol.

Preparación de fase dos (basado en un litro de preparado):

1. Tomar botella dos, preparada. 
2. Retirar 100 mililitros de la misma. (Retirar un 10% del contenido)
3. Pesar en un bol de cristal 100 mililitros de EG.
4. Pasarlos a la botella por un embudo.
5. Cerrar la botella.
6. Sacudir con fuerza para mezclar.
7. Dejar reposar diez minutos.
8. Almacenar en nevera. 

Preparación de fase tres(basado en un litro de preparado):

1. Tomar botella dos, preparada. 
2. Retirar 300 mililitros de la misma. (Retirar un 30% del contenido)
3. Pesar en un bol de cristal 300 mililitros de EG.
4. Pasarlos a la botella por un embudo.
5. Cerrar la botella.
6. Sacudir con fuerza para mezclar.
7. Dejar reposar diez minutos.
8. Almacenar en nevera.

Para la formula para seres humanos sólo hay que multiplicar por cinco las cantidades.

Fuentes:

• Cryonics Institute

¿Cómo fabricar la solución de limpieza circulatoria?

Tanto para la fase 1 cómo para la base de las demás fases formularemos lo que en inglés se llama 'Blood washout' o limpiador circulatorio. Es un suero modificado que se prepara para sustituir la sangre de los órganos a la hora de ser trasplantados. Limpia el sistema circulatorio de cualquier remanente de sangre, previene que se cierren las venas y arterias y da soporte a los tejidos.

Lo llamaremos para la fase uno , perfusato. Para las fases dos, tres y cuatro solución portadora.Describiré paso a paso la producción de un litro  de perfusato. En caso de un animal pequeño para perfusión sólo para la cabeza se usará medio litro.

Para seres humanos es necesario incrementar la proporción en 5 litros.

Proceso:

1. Lavar y desinfectar una botella de cristal para mezclar componentes.
2. Pesar y pasar por embudo a la botella las siguientes cantidades de:
1. manitol > 9.11 grs
2. glucosa >32.44 grs
3. KCL (cloruro potásico) > 2.24 grs
4. Bicarbonato de sodio > 0.24 grs
5. TRIS > 1.21 grs
6. HCL > 8 ml ( ocho gotas exactas con un gotero al suero en la fase final.)
7. SDS (lauril sulfato) > 0.70 gr (disolver en un gramo de agua caliente, volcar en la botella) (Atención!: Agregar sólo para la fase uno)
   
8. Citrato de sodio: 200 miligramos.
9. Abrir botella de suero de perfusión.
10. Volver por embudo a la botella de cristal.
11. Sacudir fuertemente para mezclar. Dejar reposar.
12. Pasar por embudo a las botellas correspondientes de 1/2L o 1L según el caso y pasos de mezcla posterior.
13. Almacenar en nevera.
14. Dejará preparada o 4 botellas de 1L o 4 botellas de 1/2L, según el caso requerido.

Fuentes de origen:

• Cryonics Institute

¿Qué herramientas necesito?

Para operar con seguridad los materiales necesitaremos tanto un lugar ordenado, tranquilo cómo perfectamente limpio y desinfectado.

También necesitaremos indumentaria para protegernos y elementos de almacenamiento de los productos, una nevera para preservar los productos. Y un mechero Bunsen o una vitrocerámica dónde calentar el material.

Insisto, lavar, ventilar y desinfectar la zona para máxima higiene.

• Guantes de látex
• mascarilla
• un delantal o una bata de laboratorio
• Una redecilla para el pelo.
• Una mesa de trabajo iluminada
• una bascula electrónica
• Un cazo de acero para mezcla de ciertos elementos en caliente.
• Un filtro fino
• cuatro botellas de 1 Litro (animal grande) o 1/2 Litro (animal pequeño)
• Cuenco de plástico o vidrio para medir/pesar los productos químicos.
• Cuchara de acero inoxidable
• Un embudo
• Un cazo de vidrio grande o acero para mezclar elementos en frío
• Una caja de polietileno expandido para almacenar hielo (Se venden para envío de pescado)
• Etiquetas para las botellas.

¿Qué y dónde comprar los productos necesarios?

Aquí se nombra una lista de productos para comprar previamente por parte del propietario de la mascota. Se pueden comprar todos ellos en una tienda de química comercial en cualquier ciudad. Ejemplo de ello son Manuel Riesgo o Mezcla Perfecta. Otros productos puedes comprarlos en Leroy Merlin.

1. DMSO (Dimetil Sulfóxido) [T.química]
2. Monoetilenglicol [T.química]
3. Selvol (Alcohol de polivinilo [opción a investigar])
4. Lauril sulfato [T.química]
5. Nitroprusiato de sodio [T.química]
6. Manitol [T.química]
7. Glicerina [Farmacia]
8. Formol [T.química]
9. Alcohol etílico [Farmacia]
10. Ácido acético [T.química]
11. Cloruro potásico [T.química]
12. Tampón Buffer Salino o TRIS [Farmacias]
13. Glucosa [T.química]
14. Tres botellas de suero salino de perfusión de 1L [Farmacia]

Al final el coste de todos éstos productos químicos puede llegar a 100 €, sabiendo combinar las compras con otras personas para repartir gastos. Ya que en el caso del selvol, nitroprusiato, formol, lauril sulfato las cantidades necesarias a aplicar se miden en miligramos. Y por tanto el gasto es alto por la simple razón de que tendremos más productos químicos de los necesarios para uno a cuatro mascotas.

¿Qué medicamentos inyectar?

La medicación a inyectar en el animal para prepararlo en preservación criogénica tiene que ser :

• Heparina
• Citrato tri sódico (Si no, se añade a la solución de limpieza circulatoria)
• Nitro-prusiato de sodio (Si no, se añade a la solución de limpieza circulatoria)
• Aspirina (ingesta, excepto en gatos) consultar con el vetarinario.
•  Ketamina (anestésico y protector cerebral, consultar veterinario)
• Suplemento polivitaminico y de aceites de pescado la semana anterior. (Controlando el estado de la mascota con el veterinario)

0 - ¿Cómo planificar el proceso?

Para llevar a cabo un procedimiento de preservación crio-génica con éxito es importante hacer un plan realista. Tener en cuenta que el sujeto en cuestión (mascota o persona) fallece pronto. Vamos a orientar todo el proceso en éste caso a mascotas, que será para preservación de la cabeza.

Tenemos tiempo, recurso y presupuesto limitado. Suponiendo que tenemos una instalación donde alojarla finalmente, antes vamos a ponernos en el peor de los casos: tener que hacerlo todo nosotros solos.

Éste primer artículo es la base de la siguiente guía y actúa de índice numerado.

Necesitamos saber que productos, materiales y cantidades vamos a necesitar.

Donde comprarlo y cuanto suele costar (varia dónde se compra)

Tener en cuenta que esto es un proceso experimental, no se sabe si funcionara y hay que mantenerse escépticos.
Se agrega nuevo enlace; cómo proceder en casos de emergencia con mascotas.

Primeros pasos:

1. ¿Cómo planificar el proceso?
2. ¿Cómo construir un laboratorio hermético portátil?
3. ¿Qué medicamentos inyectar?
4. ¿Qué y dónde comprar los productos necesarios?
5. ¿Qué herramientas necesito?
6. ¿Cómo fabricar la solución de limpieza circulatoria?
7. ¿Cómo fabricar solución de los pasos dos y tres?
8. ¿Cómo fabricar VM-1?
9. ¿Cómo perfundir a una mascota por un profesional? (En desarrollo)
10. ¿Cómo perfundir a una persona por un profesional? (En desarrollo)
11. ¿Cómo montar un equipo de perfusión por gravedad?(Pendiente mejora)
12. ¿Cómo preservar tejido biológico por si todo falla?
    
13. ¿Cómo tener un archivo biográfico? ¿Y por qué?
    

Creación de instalaciones (pendiente, sólo técnico)

1. ¿Cómo fabricar una cámara enfriadora?  (En desarrollo)
2. ¿Cómo obtener un criostato o dewar?  (En desarrollo)
3. ¿Cómo preparar un envío a una instalación criónica?
4. ¿Cómo tener un generador LN2? (En desarrollo)
5. ¿Cómo construir una caja de stand-by para mascotas? (En desarrollo)
6. ¿Cómo obtener un equipo de stand-by para personas?(En desarrollo)

Logística:

1. Estrategias de financiación criónica.